(Flow cytometry, FCM) minangka penganalisa sel sing ngukur intensitas fluoresensi penanda sel sing diwarnai. Iki minangka teknologi berteknologi tinggi sing dikembangake adhedhasar analisis lan ngurutake sel tunggal. Bisa kanthi cepet ngukur lan nggolongake ukuran, struktur internal, DNA, RNA, protein, antigen lan sifat fisik utawa kimia sel liyane, lan bisa adhedhasar koleksi klasifikasi kasebut.
Cytometer aliran utamane kasusun saka limang bagean ing ngisor iki:
1 Ruang alir lan sistem fluida
2 Sumber cahya laser lan sistem mbentuk sinar
3 Sistem optik
4 Elektronika, panyimpenan, tampilan lan sistem analisis
5 Sistem sortasi sel
Antarane wong-wong mau, eksitasi laser ing sumber cahya laser lan sistem pembentuk sinar minangka pangukuran utama sinyal fluoresensi ing sitometri aliran. Intensitas cahya eksitasi lan wektu cahya ana hubungane karo intensitas sinyal fluoresensi. Laser minangka sumber cahya sing koheren sing bisa nyedhiyakake katerangan dawa gelombang siji, intensitas dhuwur, lan stabilitas dhuwur. Iki minangka sumber cahya eksitasi sing cocog kanggo nyukupi syarat kasebut.
Ana rong lensa silinder antarane sumber laser lan kamar aliran. Lensa iki fokus sinar laser kanthi bagean salib bunder sing dipancarake saka sumber laser menyang sinar elips kanthi potongan silang sing luwih cilik (22 μm × 66 μm). Energi laser ing sinar elips iki disebarake miturut distribusi normal, njamin intensitas katerangan sing konsisten kanggo sel sing ngliwati area deteksi laser. Ing sisih liya, sistem optik kasusun saka pirang-pirang set lensa, pinholes, lan saringan, sing bisa dipérang dadi rong klompok: hulu lan hilir saka kamar aliran.
Sistem optik ing ngarep kamar aliran kasusun saka lensa lan pinhole. Fungsi utama lensa lan pinhole (biasane rong lensa lan pinhole) yaiku fokus sinar laser kanthi bagean salib bunder sing dipancarake dening sumber laser menyang sinar elips kanthi potongan silang sing luwih cilik. Iki nyebarake energi laser miturut distribusi normal, njamin intensitas katerangan sing konsisten kanggo sel ing wilayah deteksi laser lan nyuda gangguan saka cahya sing nyimpang.
Ana telung jinis utama saringan:
1: Filter long pass (LPF) - mung ngidini cahya kanthi dawa gelombang sing luwih dhuwur tinimbang nilai tartamtu kanggo dilewati.
2: Filter short-pass (SPF) - mung ngidini cahya karo dawa gelombang ing ngisor nilai tartamtu kanggo pass liwat.
3: Filter bandpass (BPF) - mung ngidini cahya ing sawetara dawa gelombang tartamtu kanggo liwat.
Kombinasi saringan sing beda bisa ngarahake sinyal fluoresensi kanthi dawa gelombang sing beda menyang tabung photomultiplier individu (PMT). Contone, saringan kanggo ndeteksi fluoresensi ijo (FITC) ing ngarep PMT yaiku LPF550 lan BPF525. Filter sing digunakake kanggo ndeteksi fluoresensi oranye-abang (PE) ing ngarep PMT yaiku LPF600 lan BPF575. Filter kanggo ndeteksi fluoresensi abang (CY5) ing ngarep PMT yaiku LPF650 lan BPF675.
Sitometri aliran utamané digunakake kanggo ngurutake sel. Kanthi kemajuan teknologi komputer, pangembangan imunologi lan panemuan teknologi antibodi monoklonal, aplikasi ing biologi, obat-obatan, farmasi lan lapangan liyane saya nyebar. Aplikasi kasebut kalebu analisis dinamika sel, apoptosis sel, ngetik sel, diagnosis tumor, analisis khasiat obat, lsp.
Wektu kirim: Sep-21-2023
